Trans RNA 轉(zhuǎn)染試劑

制膠 蛋白質(zhì)生物學(xué) 試劑

• 價格￥980
• 規(guī)格0.5ml
• 貨號HKR062
• 單位支
• 品牌HaoKebio

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【產(chǎn)品信息】

【產(chǎn)品簡介】

Trans RNA 轉(zhuǎn)染試劑（下文簡稱“Trans ”）采用新型脂質(zhì)體納米材料，可用來轉(zhuǎn)染 siRNA、miRNA 等 150bp 以內(nèi)的小分子 RNA 和 DNA，轉(zhuǎn)染細(xì)胞包括絕大多數(shù)貼壁生長的細(xì)胞，如一般細(xì)胞株、腫瘤細(xì)胞株等。

本產(chǎn)品是一類快捷高效即用型試劑溶液，僅需在 EP 管中將細(xì)胞培液與 siRNA 或 miRNA等轉(zhuǎn)染目的小 RNA 同轉(zhuǎn)染試劑混合，室溫孵育約 2 min 后加入完全細(xì)胞培養(yǎng)液中即可，血清對轉(zhuǎn)染效果沒有影響，實驗過程無需刻意添加或更換培養(yǎng)液。??

【儲存與運輸】

藍(lán)冰運輸， 4℃保存，有效期一年。

【使用方法】

使用方法（以 24 孔板為例，其他培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染請參考表 1）

1．接種細(xì)胞

對于貼壁細(xì)胞，轉(zhuǎn)染前 18-24 h 進(jìn)行鋪板，本轉(zhuǎn)染試劑要求細(xì)胞鋪板密度不高，建議 70%-90%為佳。

【注】：培養(yǎng)液中的血清不影響轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實驗條件影響，建議初次使用時設(shè)置梯度進(jìn)行優(yōu)化最佳使用量。

2．準(zhǔn)備 Trans-轉(zhuǎn)染目的小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)復(fù)合物

(1) 對于每孔細(xì)胞， 將 20 pmol 待轉(zhuǎn)染目的小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)稀釋到 50 μL 基礎(chǔ)培養(yǎng)基或完全培養(yǎng)基中（無需額外的 Opti-MEM 培養(yǎng)基），混勻。

(2) 對于每孔細(xì)胞，將 1.25-2.5 μL（視細(xì)胞類型調(diào)整） Trans 轉(zhuǎn)染試劑添加到上述步驟（1）中的混合培液中，輕輕混勻。

(3) 室溫孵育約 2 min。

3．轉(zhuǎn)染細(xì)胞

(1) 將上述孵育完成的轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻滴入到含細(xì)胞的培養(yǎng)皿中。輕輕晃動培養(yǎng)皿或輕微振蕩，讓轉(zhuǎn)染復(fù)合物分散均勻。

(2) 在 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 24-48 h，無需更換新的培養(yǎng)液，之后即可對轉(zhuǎn)入基因表達(dá)分析。

【注意事項】

1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2. 小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)質(zhì)量：請務(wù)必使用高純度無內(nèi)毒素轉(zhuǎn)染級 RNA。

3. 細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保細(xì)胞沒有被細(xì)菌、真菌或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)液要求： Trans 細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染，并且轉(zhuǎn)染前后不需要換培養(yǎng)基。

確保細(xì)胞培養(yǎng)液沒有被細(xì)菌、真菌或支原體污染。

5. 試劑用量的優(yōu)化：RNA 濃度和轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實驗條件影響，初次使用應(yīng)優(yōu)化 RNA 濃 度和轉(zhuǎn)染試劑量以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。使用者可嘗試每 20 pmol RNA 使用 1～4 μL 體積 Trans 細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。

表 1：不同培養(yǎng)體積對應(yīng)的待轉(zhuǎn) RNA、 Trans、稀釋液用量