杭州浩克生物掃描電鏡
2410服務(wù)介紹： 掃描電鏡可以清楚看到樣本表面或者內(nèi)部某個(gè)截面的形貌特征。骨組織一般需觀察某截面結(jié)構(gòu)、骨小梁分布、骨細(xì)胞、骨髓等。骨組織及牙...
查看全文
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
資料下載
【產(chǎn)品信息】
| 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
| IF雙染+TUNEL（三染） | HKF2040 | 張 | 300元 |
石蠟切片免疫熒光實(shí)驗(yàn)步驟
1、?石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min-無水乙醇Ⅰ6min -95%酒精6min-85%酒精
6min蒸餾水洗。
2、?抗原修復(fù)：組織切片置于盛滿檸檬酸抗原修復(fù)液（PH6.0）的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進(jìn)行抗原修復(fù)，中火8min
?；?min中低火7min，此過程中應(yīng)防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。
3、?阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片加上3%的雙氧水，室溫孵育25min，將玻片置PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。
4、?血清封閉:在組化圈內(nèi)滴加3%BSA?均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。
5、?加一抗：切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈（防止抗體流走），在圈內(nèi)滴加按一定比例稀的抗體覆蓋組織。切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜。
6、?加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的二抗覆蓋組織，避光室溫孵育50min。
7、?信號(hào)放大:將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min?。滴加相對(duì)應(yīng)顏色Flare信號(hào)放大試劑，3-5min.將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min?。雙標(biāo)或者多標(biāo)的實(shí)驗(yàn)從這一步結(jié)束后重復(fù)步驟2-7，標(biāo)記第二個(gè)，最后在進(jìn)入步驟2。
8、?修復(fù)：組織切片置于盛滿EDTA修復(fù)液（PH8.0）的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進(jìn)行抗原修復(fù)，中火8min?；?min
中低火7min，此過程中應(yīng)防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。
9、?加試劑tunel
工作液：按片子數(shù)量和組織大小取tunel試劑盒內(nèi)適量試劑TdT酶和反應(yīng)液試劑1:50混合，加到圈內(nèi)覆蓋組織，切片平放于濕盒內(nèi)，37℃恒溫箱孵育1.5小時(shí)，濕盒內(nèi)加少量水保持濕度。
10、DAPI復(fù)染細(xì)胞核：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加
DAPI染液，避光室溫孵育10min。
11、封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。
?
推薦
-
-
H-Score分析（芯片）
1124服務(wù)介紹： 可分析各指標(biāo)陽性面積相關(guān)參數(shù)，包含：平均光密度值、陽性面積比、陽性面密度。一次分析即可獲取該指標(biāo)陽性面積相關(guān)參數(shù)的三個(gè)數(shù)...
查看全文 -
-
